懸浮細(xì)胞
A. 離心收集細(xì)胞樣品于1.5ml離心管內(nèi)，加入0.5ml固定液，緩緩懸起細(xì)胞，固定10分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間（可4℃過(guò)夜）。
B. 離心去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。洗滌期間手動(dòng)晃動(dòng)。
C. *后一次離心后吸去大部分液體保留約50ml液體，再緩緩懸起細(xì)胞，滴加至載玻片上，盡量使細(xì)胞分布均勻。
D. 稍晾干，使細(xì)胞貼在載玻片上不易隨液體流動(dòng)。
E. 均勻滴上0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。用吸水紙從邊緣吸去液體，微晾干。
F. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。
H. 熒光顯微鏡可檢測(cè)到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長(zhǎng)在350nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)在460nm左.
組織切片
A. 對(duì)于任何常見(jiàn)切片，處理至常規(guī)可以進(jìn)行**染色時(shí)，或完成常規(guī)的**染色后，即可進(jìn)行后續(xù)的Hoechst染色。
B. PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次?？稍诹装逯胁僮鳌?/span>
C. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)。
D. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。
E. 將切片置于載玻片上，滴一滴抗淬滅封片液，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
F. 熒光顯微鏡可檢測(cè)到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長(zhǎng)在350nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)在460nm左右，
Hoechst 33258的吸收光譜和發(fā)射光譜，左側(cè)峰為吸收光譜，右側(cè)峰為發(fā)射光譜。
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