百螢生物為您推薦的鈣離子熒光探針Cal-520?為測細(xì)胞內(nèi)鈣動員提供了*強大的均勻熒光測定工具。Cal-520?AM是一種新型熒光鈣敏感染料，與現(xiàn)有的綠色鈣指示劑（如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM）相比，信號背景比和細(xì)胞內(nèi)保留率明顯提高。較高的信號/背景比和更好的細(xì)胞內(nèi)保留使Cal-520?鈣測定成為評估GPCR和鈣通道靶標(biāo)以及篩選其激動劑和拮抗劑的有力工具。
我們初步研究表明，Cal-520?AM可以很容易地加載到豚鼠心臟中并在沒有丙磺舒的情況下在那里停留幾個小時。用Cal-520?AM可以很容易地監(jiān)測鈣信號，但在與其他綠色鈣染料（如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM）相同的條件下，很難觀察到鈣信號
表 1.Fluo-3，F(xiàn)luo-4，F(xiàn)luo-8®和Cal-520?的光譜比較
|
染料
|
Ex（nm）
|
Em（nm）
|
QY *
|
|
CAL-520?
|
492
|
514
|
0.75
|
|
Fluo-3
|
506
|
525
|
0.15
|
|
Fluo-4
|
493
|
515
|
0.16
|
|
Fluo-8®
|
490
|
514
|
0.16
|
* QY =在5mM檸檬酸鈣存在下的熒光量子產(chǎn)率。
Cal-520?AM的主要特點：
? 更好的保留在細(xì)胞內(nèi)， 與Fluo-3 AM和Fluo-4 AM相比，Cal-520?AM更好地保留在活細(xì)胞中。
? 更高的靈敏度，與Fluo-3 AM和Fluo-4 AM相比，Cal-520?AM在細(xì)胞中具有更高的信號/背景比。
? 方便， Cal-520?AM的光譜與Fluo-4 AM幾乎相同。
圖1.在相同條件下，用Calnecid 孵育的Cal-520 AM（紅色曲線，貨號：21131）或Fluo- 4AM（藍(lán)色曲線）分別與CHO-K1細(xì)胞中的內(nèi)源性P2Y受體的ATP刺激的鈣響應(yīng)。將CHO-K1細(xì)胞以50,000個細(xì)胞/100μL/孔接種過夜，在hhbs中加入100μl 5μm Fluo-4 AM或Cal-520?AM和2.5 mM丙苯酸，并在37℃培養(yǎng)2小時。使用flexisation®添加ATP（50μl/孔），以達(dá)到*終指示濃度。
圖2.在相同條件下,沒有丙磺舒,分別用Cal-520?AM（紅色曲線，貨號：21131）或Fluo-4 AM（藍(lán)色曲線）孵育的CHO-K1細(xì)胞中內(nèi)ATP刺激的鈣刺激的鈣響應(yīng)。。將CHO-K1細(xì)胞以50000個/100μl/孔的速度接種在Costar 96孔黑壁/透明底板中過夜。將HHBS中的100μL5μMFluo-4AM或Cal-520 TM AM添加到細(xì)胞中，并將細(xì)胞在37℃下孵育2小時。使用FlexSation®加入ATP（50μL/孔）以實現(xiàn)*終指定濃度。
相關(guān)產(chǎn)品訂購信息
|
xi貨號
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
價格
|
|
21130
|
Cal-520?®，AM
|
10*50ug
|
2340
|
|
21131
|
Cal-520?®，AM
|
1mg
|
3540
|
|
21140
|
Cal-520?®，鉀鹽
|
10*50ug
|
3540
|
|
21141
|
Cal-520?®，鉀鹽
|
1mg
|
4740
|
|
21135
|
Cal-520?®，鈉鹽
|
10*50ug
|
3540
|
|
21136
|
Cal-520?®，鈉鹽
|
1mg
|
4740
|
|
21142
|
Cal-520FF?，AM
|
1mg
|
5940
|
|
21143
|
Cal-520FF?，AM
|
10x50 ug
|
4140
|
|
21144
|
Cal-520FF?，鉀鹽
|
10x50 ug
|
4140
|
|
21146
|
Cal-520N?，AM
|
10x50 ug
|
4140
|
|
21147
|
Cal-520N?，鉀鹽
|
10*50ug
|
4140
|
|
20501
|
Cal Green?1，AM
|
10x50 ug
|
1740
|
|
20500
|
Cal Green?1，六鉀鹽
|
10x50 ug
|
1740
|
|
20600
|
Cal-520?-葡聚糖偶聯(lián)物*MW3000*
|
1mg
|
2340
|
|
20601
|
Cal-520?-葡聚糖偶聯(lián)物*MW10000*
|
5mg
|
3540
|
|
20605
|
Cal-520?-生物素偶聯(lián)物
|
5*50ug
|
3540
|
|
20606
|
Cal-520?-生物胞素偶聯(lián)物
|
5*50ug
|
3540
|
|
20609
|
Cal-520? NHS酯
|
100ug
|
4740
|
|
20610
|
Cal-520? 馬來酰亞胺
|
100ug
|
4740
|
百螢生物是 AAT Bioquest 中國區(qū)域**代理商，為國內(nèi)提供 AAT 的原裝產(chǎn)品及產(chǎn)品定制、技術(shù)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！